ব্রুসেলা অ্যান্টিবডি এলিসা কিট

স্পেসিফিকেশন

 

পরীক্ষা পদ্ধতি এবং ব্যাখ্যা

 

পদক্ষেপ 1 পরীক্ষা পদ্ধতি

1.1 ওয়াশ সমাধান প্রস্তুতি

Working ঘনত্ব wআশিং তরল:ব্যবহারের আগে, ওয়াশ দ্রবণটি ঘরের তাপমাত্রায় (20-25 ডিগ্রি) পুনরুদ্ধার করা উচিত এবং এটিকে অভিন্ন করার জন্য সমানভাবে কাঁপানো উচিত। তারপরে বিশুদ্ধ জলের সাথে ঘন ঘন ধোয়া দ্রবণকে 20 গুণ মিশ্রিত করুন (উদাহরণস্বরূপ, 5 এমএল ঘন ধোয়ার দ্রবণ 95 মিলি বিশুদ্ধ জলে যুক্ত করা হয়), ভালভাবে মিশ্রিত করুন, এবং মিশ্রিত ওয়াশিং তরলটি 7 দিনের জন্য 2-8 ডিগ্রিতে সংরক্ষণ করা যেতে পারে।

1.2 নমুনা প্রস্তুতি

① হোল অ্যানিমাল ব্লাড নেওয়া হয়েছিল, 10 মিনিটের জন্য 4000rpm এ সেন্ট্রিফিউজ করা হয়েছিল এবং সুপারেনট্যান্ট সংগ্রহ করা হয়েছিল। সিরাম হিমোলাইসিস ছাড়াই প্রাকৃতিকভাবে জমাট বাঁধতে পারে।

- যখন পরীক্ষামূলক প্রতিক্রিয়ার সময়টি সামঞ্জস্যপূর্ণ তা নিশ্চিত করার জন্য নমুনার আকার বড় হয়। ডিলিউশন প্লেটে 1: 1 এ অ্যান্টিবডি ওয়ার্কিং সলিউশনটির সাথে সিরাম নমুনাটি মিশ্রিত করুন (70ul সিরাম নমুনা + 70 উল অ্যান্টিবডি ওয়ার্কিং সলিউশন) negative নেতিবাচক নিয়ন্ত্রণ এবং ধনাত্মক নিয়ন্ত্রণ সিরাম নমুনার সমান।

1.3 পরীক্ষা পদ্ধতি

① এনজাইম লেবেল মাইক্রোপ্লেট (নমুনার সংখ্যা অনুসারে, বিচ্ছিন্ন করা যায় এবং বেশ কয়েকবার ব্যবহার করা যেতে পারে), নেতিবাচক এবং ধনাত্মক নিয়ন্ত্রণের জন্য প্রতিটি দুটি কূপ সেট আপ করুন, এনজাইম লেবেল মাইক্রোপ্লেটে প্রিমিক্সড মিশ্রণের 100ul যুক্ত করুন। প্লেটটি cover াকতে সিলিং প্লেট ফিল্মটি ব্যবহার করে ধীরে ধীরে কূপটিতে নমুনাটি কাঁপুন এবং 30 মিনিটের জন্য 37 ডিগ্রি এ উত্সাহিত করুন।

সিলিং প্লেট ফিল্মটি খুলুন, প্লেটটিতে সমাধানটি কূপটি সরিয়ে ফেলুন, প্রতিটি কূপের জন্য 300µl কাজ ঘনত্ব ধোয়া তরল যোগ করুন এবং তারপরে ভাল তরলটি বাতিল করুন। উপরের পদক্ষেপগুলি 5 বার পুনরাবৃত্তি করুন এবং অবশেষে একটি পরিষ্কার শোষণকারী কাগজে শুকনো প্যাট করুন।

③Diluted এনজাইম কনজুগেট:এনজাইম কনজুগেটকে মিশ্রিত করুন (50 ×) 50 বার (উদাহরণস্বরূপ: 20ul এনজাইম কনজুগেট ঘন ঘন + 980} উল মিশ্রণ 1, প্রয়োজনীয় নির্দিষ্ট পরিমাণটি পরীক্ষার নমুনাগুলির সংখ্যা অনুসারে গণনা করা হয়), ভাল করে মিশ্রিত করুন এবং আলাদা করে রাখুন।

প্রতিটি কূপের সাথে 100µl এনজাইম কনজুগেট করুন, প্লেটটি cover েকে রাখুন এবং 30 মিনিটের জন্য 37 ডিগ্রিতে ইনকিউবেট করুন।

এনজাইম প্লেট ওয়াশিং, নির্দিষ্ট অপারেশন উপরের ② এর সমান ②

প্রতিটি কূপের জন্য 100µL সাবস্ট্রেট সমাধানটি যুক্ত করুন, প্লেটটি cover েকে রাখুন এবং আলো থেকে 37 ডিগ্রি দূরে 10 মিনিটের জন্য ইনকিউবেট করুন।

50µl প্রতিটি কূপের সমাধান বন্ধ করুন এবং 5 মিনিটের মধ্যে ফলাফল নির্ধারণ করুন।

 

পদক্ষেপ 2 ফলাফল ব্যাখ্যা

 

প্রতিটি কূপের ওডি 450 মানটি 96- ভাল মাইক্রোপ্লেট রিডারে পড়েছিল।

2.1 বৈধতা

 

ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণের গড় ওডি 45 0 এনএম মান ছিল <0.35 এবং নেতিবাচক নিয়ন্ত্রণ/ধনাত্মক নিয়ন্ত্রণের গড় ওডি 450nm মান 3.5 এর চেয়ে বেশি বা সমান ছিল, পরীক্ষামূলক ফলাফলগুলি বৈধ ছিল। অন্যথায়, পরীক্ষা পুনরাবৃত্তি করা উচিত।

2.2 গণনা পদ্ধতি

প্রতিটি নমুনার জন্য, সংশোধন করা নমুনা এবং নিয়ন্ত্রণ মানগুলি ব্যবহার করে পিআই (ব্লকিংকার খেয়েছে) গণনা করুন:

2.3 ফলাফল ব্যাখ্যা

যখন পিআই <20%, এটি নেতিবাচক হিসাবে বিচার করা হয়।

যখন পিআই> 30%, এটি ইতিবাচক হিসাবে বিচার করা হয়।

যখন পিআই এর চেয়ে কম বা সমান 20% এর চেয়ে কম বা 30% এর সমান হয়, তখন এটি সন্দেহজনক হিসাবে বিচার করা হয় এবং স্যাম্পলিং পুনরাবৃত্তি এবং এক সপ্তাহ পরে পরীক্ষা করার পরামর্শ দেয়।

গরম ট্যাগ: ব্রুসেলা অ্যান্টিবডি এলিসা কিট, চীন ব্রুসেলা অ্যান্টিবডি এলিসা কিট সরবরাহকারী, উত্পাদনকারী, কারখানা